ABSTRACT
RESUMEN Introducción: la enfermedad de hígado graso no alcohólico (EHGNA) se caracteriza por la acumulación de gotas lipídicas (GL) y sobre expresión de la proteína de GL Perilipina 1 (PLIN1) en los hepatocitos. En su patogénesis y progresión participan NF-ĸB, caspasa-1 y citoquinas proinflamatorias como IL-1β. La medicina popular del norte de Chile utiliza la planta Lampaya medicinalis Phil. (Verbenaceae) contra enfermedades. Objetivo: evaluar el efecto de un extracto hidroalcohólico de lampaya (EHL) sobre la expresión de marcadores inflamatorios y proteínas asociadas a las GL en hepatocitos tratados con ácidos grasos. Métodos: se incubó hepatocitos HepG2 con 0,66 mM de ácido oleico (AO) y 0,33 mM de ácido palmítico (AP) por 24 o 48 horas en presencia o no de EHL. Se evaluó la expresión proteica de NF-ĸB, PLIN1 y caspasa-1 por Western blot y la expresión de ARNm de IL-1β por qPCR. Resultados: los hepatocitos tratados por 48 h con AO/AP mostraron un aumento en la expresión de IL-1β que fue revertido por la co-incubación con EHL. Conclusión: estos antecedentes aportan nueva evidencia respecto a la actividad biológica del EHL en un modelo de alteraciones metabólicas e inflamatorias, asociadas a la EHGNA, inducidas por AO/AP en hepatocitos humanos.
ABSTRACT Introduction: Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) is characterized by the accumulation of lipid droplets (LD) and overexpression of the LD-associated protein Perilipin 1 (PLIN1). NF-ĸB, caspase-1 and proinflammatory cytokine such as IL-1β participate in the pathogenesis and progression of NAFLD. Traditional medicine in northern Chile uses the plant Lampaya medicinalis Phil. (Verbenaceae) against diseases. Objective: To evaluate the effect of a hydroalcoholic extract of lampaya (HEL) on the expression of inflammatory markers and LD-associated proteins in hepatocytes treated with fatty acids. Methods: HepG2 hepatocytes were incubated with 0.66 mM oleic acid (OA) and 0.33 mM palmitic acid (PA) for 24 or 48 h in the presence or not of HEL. The protein expression of NF-ĸB, PLIN1 and caspase-1 was evaluated by Western blot while the mRNA expression of IL-1β was assessed by qPCR. Results: hepatocytes treated for 48 h with OA/AP showed an increase in IL-1β expression that was reversed by co-incubation with HEL. Conclusion: These antecedents provide new evidence regarding the biological activity of HEL in a model of metabolic and inflammatory alterations, associated with NAFLD, induced by OA/PA in human hepatocytes.
ABSTRACT
INTRODUCCIÓN: La enfermedad del hígado graso no alcohólico (EHGNA) es la forma más común de enfermedad hepática. A nivel celular se caracteriza por la acumulación de triglicéridos (TG) en forma de gotas lipídicas (GL) dando lugar a esteatosis e inflamación. Entre los factores relevantes para la síntesis de TG se encuentran las enzimas DGAT1/2 que catalizan la etapa final de la síntesis de TG, y la proteína FABP4 que transporta lípidos intracelulares y se expresa en modelos de enfermedad hepática dependiente de obesidad. Por otra parte, TNF-α es una reconocida citoquina involucrada en el proceso inflamatorio en la EHGNA. La medicina popular del norte de Chile ha utilizado la planta Lampaya medicinalis Phil. (Verbenaceae) para el tratamiento de algunas enfermedades inflamatorias. OBJETIVO: Evaluar el efecto de un extracto hidroalcóholico de lampaya (EHL) sobre la esteatosis y expresión de marcadores de inflamación en hepatocitos tratados con ácidos grasos. Diseño experimental: Estudio in vitro en cultivos de la línea celular humana HepG2 tratadas con ácido oleico (AO) y ácido palmítico (AP). MÉTODOS: Se incubó hepatocitos HepG2 con AO/AP por 24 horas en presencia o no de EHL. Se evaluó la presencia de GL y el contenido de TG intracelulares por Oil Red O y Nile Red, respectivamente. La expresión de DGAT1/2, FABP4 y TNF-α fue evaluada por qPCR. RESULTADOS: Los hepatocitos tratados con AO/AP mostraron un aumento en las GL y TG, así como una mayor expresión de DGAT2 en comparación al control. El cotratamiento con EHL revirtió los efectos inducidos por AO/AP. CONCLUSIONES: EHL revierte el incremento en las GL, TG y en la expresión de DGAT2 inducido por AO/AP en células HepG2. Estos hallazgos sugieren un efecto hepatoprotector de la Lampaya contra la esteatosis, y apoyarían su uso complementario en el tratamiento de patologías con componente inflamatorio como la EHGNA.
Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is the most common liver disease. At the cellular level, it is characterized by the accumulation of triglycerides (TG) in the form of lipid droplets (LD), which leads to steatosis and inflammation. Among relevant factors for TG synthesis are the enzymes DGAT1/2 catalyzing the final stage of TG synthesis, and the protein FABP4 which transports intracellular lipids and is expressed in cell models of obesity-dependent liver disease. Additionally, TNF-α is a cytokine involved in the inflammatory process associated to NAFDL. Lampaya medicinalis Phil. (Verbenaceae) is a plant used in folk medicine in northern Chile to treat some inflammatory diseases. OBJECTIVE: To evaluate the effect of the hydroalcoholic extract of lampaya (HEL) on steatosis and the expression of inflammatory markers in hepatocytes treated with fatty acids. Study design: In vitro study in cultures of the human HepG2 cell line treated with oleic acid (OA) and palmitic acid (PA). METHODS: HepG2 hepatocytes were incubated with OA/PA for 24 hours in the presence and absence of HEL. The formation of LD and the accumulation of intracellular TG were assessed by Oil Red O and Nile Red, respectively. The expression of DGAT1/2, FABP4 and TNF-α was assessed by qPCR. RESULTS: The treatment with OA/PA increased the levels of LD and TG as well as the expression of DGAT2 in HepG2 hepatocytes compared to control cells. HEL cotreatment counteracted OA/PA-induced effects. CONCLUSIONS: HEL prevents the increase in LD and TG levels and DGAT2 expression induced by OA/PA in HepG2 cells. These findings suggest that lampaya may have a protective effect against hepatic steatosis, which would support its complementary use in the treatment of pathologies associated with inflammation, such as NAFLD.